3D細(xì)胞培養(yǎng)的詳細(xì)工作流程

3D細(xì)胞培養(yǎng)的詳細(xì)工作流程

樣品制備

通過機械和酶消化分離細(xì)胞，選擇合適的酶和條件，處理時間和環(huán)境溫度等因素也至關(guān)重要，通常包括用無菌剪刀分離組織、用膠原酶酶解和均質(zhì)化3。

獲得均勻的單細(xì)胞懸液，涉及通過熒光活化細(xì)胞分選（FACS）或磁活化細(xì)胞分選（MACS）進行純化，或使用購買的癌細(xì)胞系等用于生成球體的細(xì)胞，通常**立即培養(yǎng)3D細(xì)胞，盡管存在冷凍特定細(xì)胞類型的方案3。

3D細(xì)胞培養(yǎng)實施：除了球體培養(yǎng)和類器官培養(yǎng)等無支架方法外，基于支架的3D細(xì)胞培養(yǎng)模型也廣泛應(yīng)用，采用生物相容性支架，提供細(xì)胞可以附著、生長并組織成三維結(jié)構(gòu)的支持性基質(zhì)3。

成像與數(shù)據(jù)分析

利用如ibidi的用于3D細(xì)胞培養(yǎng)檢測成像的解決方案進行成像3。

3D細(xì)胞培養(yǎng)實驗的典型讀數(shù)包括分析分泌和細(xì)胞內(nèi)生物分子，評估活力、生長、分化以及與其他細(xì)胞、生物體或化合物的相互作用，各種定量下游分析包括代謝測量、毒理學(xué)篩選、轉(zhuǎn)錄組分析等